Emface菲斯波：治療對膠原蛋白與彈性蛋白含量的影響

以下非本院案例，僅提供文獻資料供參考：

REFERENCES：以上來自期刊：Journal of Cosmetic Dermatology；文獻網址：https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38468421/；https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38235951/

摘要

背景：皮膚暴露於內在和外在因素會導致與年齡相關的變化，進而降低真皮中的膠原蛋白和彈性纖維含量。

目的：本研究探討了一種新型面部肌肉刺激技術與射頻（RF）加熱相結合的效果，對真皮膠原蛋白和彈性纖維含量的影響，旨在治療面部皺紋和皮膚鬆弛。

方法：主動組（N=6）接受了四次20分鐘的面部治療，每週一次，治療包括同步的RF和面部肌肉刺激。對照組（N=1）未接受治療。基線、1個月和3個月隨訪期間取的皮膚活檢樣本進行了組織學評估，以確定膠原蛋白和彈性纖維的含量。一組獨立的美容師評估了面部皮膚的外觀和皺紋嚴重程度。病人的安全性得到了監測。

結果：在主動組中，膠原蛋白占據的區域在1個月和3個月隨訪時分別達到11.91±1.80×10^6 μm²（+25.32%，p＜0.05）和12.35±1.44×10^5 μm²（+30.00%，p＜0.05）。彈性纖維占據的區域在1個月和3個月隨訪時分別為1.64±0.14×10^5 μm²（+67.23%，p＜0.05）和1.99±0.21×10^5 μm²（+102.80%，p＜0.05）。對照組的膠原蛋白和彈性纖維未顯示出顯著差異（p＞0.05）。主動組的皺紋評分從5（中度，II級）降至3（輕度，I級）。除對照組外，所有主動組受試者的外觀在治療後有所改善。未發生不良事件或副作用。

結論：真皮膠原蛋白和彈性纖維水平的下降會導致皮膚彈性逐漸下降，從而引起面部皺紋和皮膚鬆弛。研究結果顯示，經過同步的非侵入性RF和面部肌肉刺激治療後，面部外觀顯著改善，真皮層膠原蛋白和彈性纖維含量增加。

關鍵詞：膠原蛋白、彈性纖維、射頻、再生

1．引言

面部衰老是一個複雜的過程，涉及面部多個層次的變化，包括皮膚、皮下脂肪、淺層肌膜系統（SMAS）、肌肉和骨骼。臉部肌肉，尤其是提肌（如顴大肌或額肌），往往會失去其靜息張力，這導致面部組織的重新定位。提肌無法保持覆蓋組織的位置，必然導致軟組織下垂。皮膚和SMAS受到膠原蛋白和彈性蛋白流失的影響，這些是主要的結構和結締組織蛋白。這些蛋白質的減少會導致皺紋形成、彈性降低和面部下垂。此外，SMAS層的變薄也會導致鬆弛和下垂。因此，處理面部衰老時，需要考慮所有相關因素，並理想地針對所有相關成分。然而，目前的非侵入性方法僅專注於治療皮膚或人為提供面部體積以補償重新定位的組織，或通過抑制某些肌肉來平衡其他肌肉的張力。

最近，一種新穎的方法被提出，即使用非侵入性應用裝置的設備，同時應用高強度聚焦電刺激（HIFES）技術和同步射頻（RF），以增強面部外觀。HIFES通過產生強電流來選擇性地刺激提肌，誘導超極限的、不自主的肌肉收縮。電流去極化運動神經元膜，產生信號促使肌肉收縮。招募的熱休克蛋白和衛星細胞可以支持肌肉微蛋白質結構的改變。研究表明，反覆應用HIFES可以誘導肌肉蛋白質合成，這可能導致肌肉組織密度的增加以及額部（額肌）和頰部（顴大肌、顴小肌和提口角肌）選擇性肌肉的整體增強。單極RF是一種振盪電流，部分被組織吸收，從而產生熱量。這種加熱一段時間可以增加成纖維細胞活動並解開氫鍵，使膠原蛋白變性。加熱刺激停止後，身體開始啟動正常的再生過程，導致新膠原蛋白和新彈性蛋白的生成。通過重複處理，膠原蛋白和彈性蛋白會不斷重建。

本研究包括對接受非侵入性HIFES和RF應用的患者的額部和頰部皮膚組織的組織學檢查。研究的目的是評估與結締組織結構蛋白（膠原蛋白和彈性蛋白）相關的變化，並評估這種聯合治療模式在增強皮膚結構完整性（如先前的動物模型研究所示）以及改善面部美觀上的有效性。

2．材料和方法

2.1 研究設計和受試者人群

本研究為前瞻性、單中心、干預性、兩組平行的開放標籤設計，招募了七名有興趣參加非侵入性面部煥膚臨床研究的女性受試者。六名（6）活躍組受試者 [年齡39–62歲（平均55.83 ± 8.56歲），BMI 22.73–38.59（27.65 ± 5.87 kg/m²），Fitzpatrick皮膚類型I至IV] 接受了面頰和額部的HIFES + RF同時治療。1名（1）受試者作為對照組，未接受治療 [62歲，BMI 36.9 kg/m²，Fitzpatrick皮膚類型IV]。

活躍組受試者（N=6）接受了四次20分鐘的面部治療，每週一次，使用一次性、自粘的非侵入性應用電極（EMFACE裝置，BTL Industries Ltd.，波士頓，MA）。治療涉及整個面部（即額部和面頰同時治療；參見圖1了解電極放置位置）。受試者採仰臥姿勢進行治療，無需麻醉。HIFES和RF的能量強度根據患者的反饋和耐受性在0%–100%範圍內單獨設置。在治療前，面部的首飾和顯眼的頭髮被移除。

在基線、1個月和3個月的隨訪訪問中，從耳周區域進行了皮膚活檢。所有活檢樣本直徑為3毫米（Kruse Buster），均為全層（約深度2.0–3.0毫米），由研究人員在現場進行。使用局部麻醉劑麻醉活檢取樣區域。隨後閉合和消毒活檢傷口，並監測癒合過程。參與者獲得了詳細的居家傷口護理說明，以確保適當癒合。納入標準為21歲以上的健康受試者，在放鬆狀態下面頰和額部（面部）有明顯的皺紋，願意在研究參與期間避免任何其他面部治療。排除標準禁止有活動性銀屑病、濕疹、局部感染、神經系統疾病或電針治療的受試者。該研究已獲IRB批准並在clinicaltrials.gov（NCT05524662）註冊。

2.2 組織學評估

獲得的皮膚組織樣本進行了組織學檢查。所有樣本均正確標記了受試者ID及相應訪問的描述—預處理（基線）和後處理（1個月和3個月隨訪）。樣本被切片，並用染劑染色以顯示和檢查膠原蛋白和彈性蛋白。

臨床組織學家分析了染色樣本，以評估組織中的變化，包括任何病理變化，以排除由HIFES和RF非侵入性電極應用引起的潛在皮膚損傷。

染色過程使用了傳統的Masson三色染色法，這可以詳細地視覺評估膠原蛋白及一般組織結構。膠原纖維呈綠色。Orcein染色被用來專門顯示樣本中的彈性蛋白。彈性蛋白纖維呈棕色至深棕色。染色樣本被裝載到顯微鏡載玻片上。

使用自動載玻片掃描顯微鏡（Hitachi Axio Scan.Z1，Carl Zeiss AG，德國；20×/0.8NA Plan-Apochromat物鏡）在明場下觀察和拍攝載玻片。膠原蛋白和彈性蛋白的定量使用Image J軟件進行，基於HSB（色調-飽和度-亮度）顏色系統的半自動分割。確定了區分膠原蛋白和彈性蛋白纖維與背景的適當閾值，並在選定的興趣區域（ROI = 1800 × 1200 μm；2.16 × 10⁶ μm²）進行測量，以量化組織切片中膠原蛋白和彈性蛋白所佔的面積。在選擇了膠原蛋白和彈性蛋白纖維後，其密度以纖維在評估圖像中的ROI所佔的面積（平方微米）表示。

統計分析使用了Student's t檢驗和Friedman單向重複測量ANOVA檢驗，顯著性水平設定為α=0.05。對於多重比較，進行了事後Tukey HSD檢驗。

這一過程對這項兩組研究設計中的七名受試者進行了重複，其中包括一名對照受試者和六名活躍治療受試者。比較了活躍組受試者和對照受試者治療前後膠原蛋白和彈性蛋白含量的平均面積變化。

2.3 美學改善和皺紋嚴重程度

受試者在治療前（基線）和隨訪訪問時拍攝了數位面部照片。三位獨立於彼此和診所的評估員根據全球美學改善量表（GAIS）評估面部皮膚外觀，通過比較隨訪訪問的前後照片來進行評估。

另一組三名評估員收到相同的照片集，根據Fitzpatrick皺紋彈性變性量表（FWES）評估皮膚皺紋和線條的程度（皺紋嚴重程度）。評估員對隨訪階段（即，照片未按隨訪訪問標記，評估員查看照片的順序隨機）的情況保持盲目。每位評估員為每張照片分配一個FWES等級。

2.4 安全性

在試驗期間，對治療或研究相關的不良事件和副作用進行了跟踪和監測。

3．結果

在21名受試者中，18名完成了所有預定的治療會話和跟進訪問。治療設置被良好耐受，HIFES的耐受範圍為35%至75%，RF為100%（其中一名受試者耐受了75%的RF輸出）。

3.1 膠原蛋白

在活躍組中，基線時膠原蛋白的平均佔據面積為 9.50 ± 1.77 × 10⁵ μm²。1個月和3個月的隨訪訪問中，膠原蛋白佔據的平均面積分別增加至 11.91 ± 1.80 × 10⁶ μm²（p ＜ 0.05）和 12.35 ± 1.44 × 10⁵ μm²（p ＜ 0.05）。與基線相比，活躍組的膠原蛋白含量在兩次治療後隨訪中均顯著增加（p ＜ 0.05）。在對照組中，膠原纖維沒有顯著變化（p ＞ 0.05），膠原蛋白含量在整個研究期間波動於 9.68 ± 0.45 × 10⁵ μm² 至 9.51 ± 0.23 × 10⁵ μm² 之間。活躍組的膠原蛋白佔據面積在1個月（+25.32%）和3個月（+30.00%）的隨訪中有顯著差異（p ＜ 0.05）（見圖2）。

3.2 彈性蛋白

在活躍組中，基線時彈性蛋白的平均佔據面積為 0.98 ± 0.34 × 10⁵ μm²。1個月隨訪時，彈性蛋白的平均面積增加至 1.64 ± 0.14 × 10⁵ μm²。3個月隨訪時，彈性蛋白的面積進一步增加至 1.99 ± 0.21 × 10⁵ μm²。與基線相比，兩次隨訪中的彈性蛋白佔據面積均有顯著增加（p ＜ 0.05）。在1個月（+67.23%）和3個月（+102.80%）的隨訪中，活躍組與對照組之間的彈性蛋白含量有顯著差異（p ＜ 0.05）（見圖2）。在對照組中，隨訪點的彈性蛋白密度沒有顯著變化（p ＞ 0.05），彈性蛋白含量範圍為 1.26 ± 0.16 × 10⁵ μm² 至 1.30 ± 0.12 × 10⁵ μm²。

圖3和圖4顯示了活躍組膠原蛋白和彈性蛋白顯微評估結果的實例（見圖5）。

3.3 安全性

沒有發生與治療相關的不良事件或副作用。活檢樣本的組織病理學分析未發現任何併發症或不希望的意外效果。

3.4 GAIS 和 FWES 結果

總體而言，GAIS評估的平均分數顯示，除對照組外，所有受試者的外觀在治療後有所改善。活躍組的平均分數在FWES和GAIS上減少了2級，從5級（中度，II級皺紋）下降至3級（輕度，I級細紋）。評估者未發現對照組外觀的任何變化。

GAIS和FWES獨立評審員評估的詳細結果見表1和表2。

4．討論

本研究表明，同時使用HIFES和RF進行非侵入性面部治療可以促進膠原蛋白和彈性蛋白的表達。在本研究中，3個月後的皮膚活檢分析顯示膠原蛋白（+30%）和彈性蛋白（+103%）含量顯著增加（p ＜ 0.05）。

觀察到的彈性蛋白含量的增加超過了膠原蛋白的增加，約為三倍，這是一個值得注意的發現。初步觀察時，對彈性蛋白水平的變化可能看起來有些異常。然而，檢查活躍組的基線數據後，可以發現彈性蛋白水平顯著降低，約占總截面面積的3.5%。相比之下，典型的生理彈性蛋白水平通常在5%–10%範圍內。在治療後，彈性蛋白水平增加了一倍，占據了7%的切片面積。這表明皮膚彈性蛋白水平已恢復到健康的生理水平。14–16

此外，由於SMAS是與面部其他結構交織在一起的組織，由膠原蛋白和彈性蛋白組成，我們認為SMAS層也受到影響並幫助了結果。17

此外，觀察到的結果不應被視為故障（例如，染色過程缺陷）或不常見的現象。這一點得到Kinney等人進行的研究的支持，他們檢查了HIFES+RF技術在動物模型上的效果。在他們的研究中，彈性蛋白水平顯著增加了110.8%，這與我們的研究結果一致。Kinney等人報告的膠原蛋白增長也顯著，為26.3%。

彈性蛋白和膠原蛋白的顯著增加可歸因於HIFES+RF技術的多模式方法。RF能量的應用已被發現能夠引發纖維母細胞的熱反應，而HIFES技術則通過誘發肌肉收縮來機械性地刺激皮膚。這些過程已顯示出對纖維母細胞的相似反應。18–21 本研究的結果顯示，膠原蛋白和彈性蛋白的濃度一致地上升，並在3個月後達到最高點。這與現有的理解一致，即纖維母細胞對此類外部刺激的反應需要一定時間。然而，還需要進一步的研究來檢查這種增長的持久性。

除了組織學方法，本研究還包括了FWES和GAIS評估（由六位合格的獨立臨床美容師進行），所有評估均基於客觀標準。因此，對患者外觀的客觀評價提供了關於關鍵皮膚成分（即彈性蛋白和膠原蛋白）顯著增加的見解。結果顯示，經過治療後，這些重要的皮膚成分得到了顯著提升。

根據這兩個評估量表的結果，活躍組顯示出顯著的改善，而對照組則沒有變化。這些發現提供了對HIFES+RF模式再生效果的實證支持。這種客觀的評估方法顯示了積極的結果。面部皺紋評估量表（FWES）的結果顯示，那些基線評分為6分或以上（即中度至重度皺紋）的患者經歷了更顯著的改善（見表1）。與此相對，全球美容改善量表（GAIS）的結果也顯示出類似的趨勢（見表2）。然而，編號2的受試者在基線時只有輕微皺紋，根據FWES的評估沒有顯著改善。然而，評估者在GAIS上給予了這位受試者最佳的可能分數。這一差異表明，面部肌肉在衰老過程中的參與在面部再生中具有重要意義，如前言部分所述。本研究的結果可能表明，RF和HIFES兩種模式的組合使用比僅使用其中一種療法更為有效。

此外，研究設備的實用性提高了操作員和患者的舒適度。免手持、自粘的應用器在安全性和舒適性方面提供了顯著提升。操作員的疲勞被消除，患者在接受面部再生程序時不需要恢復時間或對日常生活產生影響。研究中未出現一些面部再生療法常見的副作用，如色素沉著、色斑、血腫和神經損傷。22–24

由於受試者數量有限，本臨床研究存在一定的限制。儘管全女性的樣本組也可能是一個限制因素，但需考慮到實際數據顯示女性是尋求面部美容和再生療程的主要群體。25 這可能是因為患者對自然再生療法的興趣和需求增加，相對於增強性和侵入性程序，這些療法提供了不同且更具吸引力的結果。儘管如此，仍需要進一步的體內研究來擴展這一方法的臨床應用。26